rgc-5视网膜神经节细胞 rgc-5(视网膜神经节细胞)
【细胞货号】 c1104
【细胞缩写】 rgc-5细胞
【细胞名称】 rgc-5(视网膜神经节细胞)
【背景资料】 rgc-5细胞系细胞膜或者细胞内表达的物质都与rgcs相同 ,阳性表达物有thy-1(rgcs的膜标记蛋白)、brn-3c、neuritin、nmda受体、gaba-b受体、突触素、多种神经营养因子的受体(trka、trkb、trkc、p75ntr等膜生长因子的受体)、睫状神经营养因子、胶质细胞源性神经生长因子、神经营养因子-3、神经营养因子-4、神经纤维丝蛋白-106 和-200(neurofilament protein、nf-106、nf-200)。不表达的有gfap-胶质原纤维酸性蛋白(muller细胞标记物)、突触融合蛋白、8a-1(水平细胞标记物)、hpc-1(无长突细胞标记物)。
【细胞来源】 细胞主要来源atcc、dsmz、ecacc、riken、promocell、sciencell、ecacc、jcrb、kclb、asterand、iclc以及少数国内外着名大学建系
【代次】 p4
【规格】 复苏t25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
【细胞数】 1*10(6)
【生物安全级别】 1
【生物体】 大鼠
【组织来源】 视网膜神经节细胞
【细胞形态】 成神经细胞
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95%(viability by trypan blue exclusion)
【细胞检测】 细胞不含有hiv-1、hbv、hcv、支原体、细菌、酵母和真菌
【培养条件】 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 请具体查阅相关发表文章
接收后的操作流程与注意事项:
1、如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决
2、贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(高不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养
3、生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1、吸出原培养瓶中的培养基,pbs缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min)
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基ph值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
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